摘要：中藥治疾病具有獨特療效，中藥適應癥廣，療效可靠，副作用少，開展動物用中藥制劑，將有廣闊的市場前景。該文致力于介紹中藥制劑的毒性評價方式，包括評價藥物毒性的試驗選擇、動物選擇、血常規、C 反應蛋白和生理生化指標等，從而達到評價中藥制劑是否會損傷動物的各內臟組織器官的目的，為中藥制劑的安全性評價提供理論依據。

藥物的安全性問題，在西藥研究中一直被作為首要考慮因素，但在中藥新藥的臨床研究中這個問題卻總被弱化。一直以來，中藥無毒的觀念深入人心，其實這是中藥研究史上較大的認知失誤。近年來，反復出現的“藥害事件”給我們敲醒了警鐘，對于中藥研究中毒性評價的建立，不僅不能弱化，還應該進一步加強政策扶持和資源投入，將中藥的毒性研究納入臨床研究中最重要的一環。

隨著科學技術的發展和對藥物毒性評價的重視程度增加，中藥制劑的毒性試驗設計已日趨成熟，操作簡便。現在通常做單次與長期毒性試驗，而后者對于中藥非臨床毒性的判定發揮著至關重要的作用，能對以后藥物的臨床研究提供更準確的指導。中藥毒性研究的技術要求，總體仍是依據《中藥新藥研究指南（1992）》（以下簡稱《指南》）。對于新藥中藥制劑的毒性評價，該《指南》明確指出：“如果試驗藥物中的各味藥材符合法定標準、在合成過程中未涉及特殊工藝、沒有添加毒性藥材，一般可以免做長期毒性試驗，直接進行靶動物的毒性測量”。

2.1 動物種屬選擇

重復給藥毒性試驗是藥物安全性評價的必經之路，相關的國際法規規定，至少應該選擇2 種不同種屬的動物來完成該實驗，且這2 種動物生理特性應有很大的區別，以此排除藥物在不同種屬間的毒性反應。Oson 等[3]調查研究表明，用2種不同種屬的動物進行藥物安全性評價試驗，其安全性評價的準確性會大大提高，甚至準確率是采用1 種動物的近2 倍。

為了提高藥物的安全性測評，部分發達國家藥品相關的監管部門對藥物安全性試驗中動物種屬的選擇都有著較高的要求，選擇2 種以上動物種屬進行。規定2 種動物種屬（嚙齒類和非嚙齒類）進行安全性研究有重大的意義，臨床上，嚙齒動物常用大鼠和家兔，非嚙齒動物大多數則選擇犬來完成。

2.2 年齡選擇

由于同一動物消化、呼吸、泌尿生殖、免疫、神經等組織器官系統的成熟期不同。因此試驗動物應結合器官發育年齡，一般以性成熟為標志，選擇性成熟前與后兩組相似日齡動物作實驗動物（但對于慢性毒性試驗可以采用較大日齡的性成熟未孕動物進行試驗），使毒性充分暴露。

2.3 性別和數量

試驗應包含兩種性別動物，雌雄各半。數量一般參考毒理學要求。若開展長期毒性試驗，則選擇嚙齒類動物雌雄各10～30 只，非嚙齒動物雌雄各3～6 只。

試驗中，應盡量排除非藥物因素對指標異常的影響，包括動物自身因素，如年齡、性別、數量等；人為因素，如應激因素、采樣方法、采樣時間、樣本制備和保存以及實驗過程中的其他因素。

當前對中藥復方的藥效物質基礎與毒性成分不夠清晰，目前尚無科學靈敏的毒性檢測指標，只能依賴基礎指標、尿常規、血常規、血液生化等指標來反映藥物的毒性。

3.1 基礎性指標

基礎性指標包括體溫、心率、血壓、飲食狀況、生長發育情況（尤其注意體質量的變化，因為體質量及其變化為毒性敏感指標）、外觀觀察、行為學測試等。

3.2 尿常規

在藥物安全性評價中，尿常規檢測需包含尿量、尿蛋白、尿潛血、尿沉渣、酸堿度等，可提示腎毒性早期風險。

3.3 血常規和C 反應蛋白

在藥物安全性評價中，血常規一直作為重要指標，它能直觀地看出各種血細胞數目的異常情況，充分反映當前機體所處的健康狀況。但血常規檢測有一定的局限性，如果損害為非感染性因素引起或損害持續時間較短，血常規各指標通常不會出現明顯變化甚至出現無變化，且檢測結果受檢測儀器和人為操作影響較大，對于機體組織器官的損傷性檢查有滯后性、非特異性和靈敏差[7]。如果僅僅使用血常規作為藥物安全性評價指標，很難規避非藥物性因素對試驗造成的影響。

C 反應蛋白通過使用超敏感的檢測技術，具有較高準確性和靈敏性，在臨床上發揮重要的輔助性診斷功能。當機體出現損傷時，C 反應蛋白會在短時間內出現大幅度波動，能夠較準確地預測心血管事件；當機體處于健康狀態時，C 反應蛋白的量會一直處于較低水平，一旦機體組織器官損傷，肝細胞會立即啟動該物質的合成機制，只需數小時的時間，C 反應蛋白水平就會出現急劇升高[7]。也就是說，當藥物到達機體后，如果短時間內引起組織器官的損傷，通過C 反應蛋白就能反映出來，而血常規因其延遲性以及對感染性損害診斷的靈敏性，此時檢測血常規相關指標，極有可能出現無明顯變化甚至無變化的情況，這一結果有助于排除感染性因素對試驗結果的影響，提高試驗的準確性。

同時，C 反應蛋白也可作為診斷急性心肌梗死的重要指標，研究發現在發生該病的患者身上C 反應蛋白水平會呈現如下一些特征，在臨病發的前1～2d 會出現明顯升高，而在第3 天后就開始出現小幅下降，直至發病的1～2 周內恢復正常，這一特質對于藥物安全性評價也有非常重要的意義。隨著免疫技術的不斷成熟，C 反應蛋白檢測技術操作已非常簡單便利，結果也穩定可靠。

綜上所述，對于藥物的安全性評價，血常規與C 反應蛋白二者協同開展，一方面可大大縮減診斷時間，另一方面也有利于排除感染性因素對試驗結果的影響，提高藥物安全性評價的準確性。

3.4 生理生化指標的建立

在臨床診斷過程中，通過采取一定的技術手段，對血液中的脂類、蛋白質以及酶、激素和機體代謝產物等各種指標具體含量的測定，稱為血液生化檢查[8,9]。可分為肝功、腎功、心臟機能、血糖血脂、胰腺功能和離子等，使用相應的檢測技術，能客觀顯示各指標的數值變化，從而評估身體主要組織器官的正常與否，在藥物的安全性毒性有重要的實際意義。

由于對中藥復方的藥效物質基礎與毒性成分不夠清晰，目前尚無科學靈敏的毒性檢測指標，只能依賴各組織器官的功能狀況、血糖和血脂等來反映藥物的毒性[6]。如轉氨酶、肌酐、尿素氮等肝腎標志物，可以在早期更靈敏地識別肝腎損害，尤其是早期的功能變化，可以反映損傷位點與毒性機制，具有更好的先進性，這些指標現已成為美國FDA 或EMA 推薦的檢測指標。

對試驗中的各組數據進行綜合分析，可通過一般觀察和動物個體數據分析，動物給藥前后的比較等方法排除其他因素產生的異常數據[10]。同時對于數據的統計分析，應選擇合理的統計方法。

藥物非臨床安全性評價中重點分析檢測指標出現異常的原因，如指標的異常反映了什么毒性或哪些組織器官的損傷，該異常是否由試驗受試物引起，是否對臨床有參考意義等,C 反應蛋白均需進行綜合分析。

綜上所述，進行中藥制劑安全性評價時，應選擇合適的毒性試驗和實驗動物，適時建立包括血常規、C 反應蛋白和生理生化等毒性評價的指標，形成綜合分析的思路，可大大提高藥物毒性研究的準確性。

參考文獻：（略）

來源：中國畜禽種業