破解養豬業難題—豬藍耳病檢測與凈化的技術之道
田克恭,河南農業大學

圖 田克恭,河南農業大學
一、豬藍耳病防控面臨的難題
1、除非洲豬瘟外,豬藍耳病是影響養豬業的頭號殺手。流行現狀:田間毒株復雜,傳播途徑多樣,臨床危害嚴重;
2、豬場感染狀態分類不規范。缺乏統一的分類標準,檢測指標不明確,檢測結果解讀不一致。
二、種豬PRRSV感染狀態的分類
1、目前行業采用的主流分類標準是2019年由AASV(美國豬獸醫協會)與美國國家豬肉委員會共同修訂的,并在2021年發布在《Journal of Swine Health and Production》雜志。

2、AASV指南—母豬場的分類
母豬場的藍耳病狀態可以分為四類:陰性,暫定陰性,陽性穩定和陽性不穩定。具體分類如下圖:


3、AASV指南-采樣要求

三、PRRSV檢測的技術之道
1、PRRSV感染后體內的病毒與抗體動態變化規律
(1)PRRSV感染后6~12h即可出現病毒血癥;病毒血癥可持續1個月以上。持續感染狀態下,病毒主要存在于淋巴組織中,在各種因素刺激下,可再次激活并通過口鼻分泌物等傳播;
(2)PRRSV感染后7~9天即可產生特異性的抗體,但早期抗體無中和活性。PRRSV感染后體內的總抗體可以維持至數月。

2、PRRSV的診斷與檢測方法
核酸檢測(RT-PCR、RT-qPCR)和抗體檢測(ELISA)均是PRRSV重要的檢測方法。

(1)核酸檢測

(2)抗體檢測
N蛋白和膜蛋白均為抗體檢測的主要靶標。
(1)N蛋白:N蛋白-病毒粒子中含量最豐富的蛋白(占40%)。N蛋白表面存在多個抗 原表位,免疫原性較強;
(2)膜蛋白轉錄或翻譯效率低下,在病毒粒子中含量低。糖蛋白的糖基化修飾遮擋病毒粒子表面的抗原表位;
(3)不同ELISA試劑盒檢測N蛋白和膜蛋白抗體的變化規律N蛋白抗體產生較早、持續時間短;膜蛋白抗體產生較晚,但持續時間長;

(4)目前常見PRRSV抗體ELISA試劑盒抗原包被情況:

① 臨床種豬場PRRSV的本底檢測與分類:

② 臨床種豬場的最終目標-凈化:

四、總結
1、田教授最后提到,種豬場陰性的標準為核酸陰性、N蛋白抗體陰性,膜蛋白抗體也陰性;
2、藍耳病的防控是一個長期的過程,需要做長期的監測;
3、檢測的頻率和數量要符合科學的要求。在中國當下,很多豬場做不到凈化沒關系,目標是先做到陽性穩定和暫定陰性。標準需要參考美國的標準。
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成功管理的結果:母豬、仔豬和哺乳期
馬克·施瓦茨,明尼蘇達大學

圖 馬克·施瓦茨,明尼蘇達大學
一、目標
給健康、健壯、高質量的小豬斷奶,同時為母豬隨后的配種、妊娠和分娩做好準備,最終的價值會反映在肥豬上(市場上)。
小豬的均勻度高,小豬群體免疫力好(抗體離散度小)。
二、達成目標的方法
1、需要重點關注生產鏈中的每一個環節:配種-妊娠期-分娩-哺乳-斷奶;
2、創建系統的方法,重點關注5個方面:后備母豬管理,體況管理,產房環境管理,分娩過程的控制和干預,擴繁體系結構和選種強度。
母豬場的藍耳病狀態可以分為四類:陰性,暫定陰性,陽性穩定和陽性不穩定。具體分類如下圖:


3、AASV指南-采樣要求

三、后備母豬本身的特性很可能會產生我們想要的結果
1、窩產仔數不僅是育種場,同樣也是擴繁及商品母豬場關注的一個指標;
2、分娩前30-60天:充足的初乳入量,減少哺乳壓力(高產母豬經常面臨的一個問題),充足的欄位空間。
四、生長和采食量
1、90日齡到初情期,限制飼料會影響乳腺的發育;
2、飼料限制的方式:空間,環境(溫度),健康挑戰。
五、配種時青年母豬年齡和體重
1、初配日齡:200-225日齡,超過225日齡以后會逐漸導致留存率降低和成本的增加;
2、初配體重:>90%的后備母豬在135-160公斤的體重范圍進行配種。不要對低于135公斤的后備母豬進行配種。
六、懷孕的后備和經產母豬
1、健康狀態及免疫力均質化:妊娠7到10周:讓后備母豬暴露在豬群中,做好馴化工作;
2、體況管理:正確的飼喂可以維持良好的體況,進而保證成功的分娩和哺乳。

七、分娩和哺乳階段
1、提供清潔的環境:
斷奶后進行去污、清潔和有效的消毒,阻斷病原微生物(輪狀病毒、球蟲、大腸桿菌、產氣莢膜梭菌、豬鏈球菌和藍耳病毒等)的循環。
2、微觀環境控制
做好仔豬保溫的工作,降低母豬的熱應激。哺乳母豬最適溫度17℃,新生仔豬是35℃。
3、飼料和水的供應
牢記畜牧業的基本要素:飼料,水和空氣,對飼料、水攝入的日常觀察。
4、為母豬和小豬營造合適的環境
八、環境管理要超過常規的環境控制
1、包括通風管理和人員管理;
2、保持安靜的環境:
(1)分娩時提供幫助,允許母豬完成她自己的任務;
(2)做好母豬的助產工作:減少難產和窒息死亡;
(3)讓新生仔豬快速攝入初乳。
九、跟蹤仔豬出生時干預措施的結果和對斷奶的影響
1、助產和巡檢的時間和頻率;
2、擦干新生仔豬;
3、窩內分批哺乳;
4、窩間寄養;
5、集中小體重仔豬到一窩。
十、允許母豬自己完成她的工作
1、出生時的干預措施是否太多?
2、創造平衡(仔豬初生重大小不一):分批哺乳,小豬運動,仔豬處理;
3、目標:出生后幾個小時內最大限度提高初乳攝入量;從出生到斷奶,最大限度地提高母乳攝入量;
4、干預:仔豬處理,免疫和母豬仔豬的日常觀察。
十一、關鍵目標:哪些數字表明取得了成功?
1、后備母豬:每窩出生的總仔數:=>16.0
2、全群每窩總仔數:=>16.5
3、窩均斷奶仔豬數:=>14.0
4、斷奶仔豬重量:=>6.4 kg
5、一胎母豬留存率:=>95%
十二、對于仔豬生長性能和母豬繁殖性能這2個指標,是否有最佳的斷奶年齡
1、保育階段需要進行干預
斷奶日齡會影響保育豬的生長表現。有研究表明,斷奶日齡在19、22、25、28天的仔豬,在斷奶后第一周體重下降的百分比分別為35.1%、28.7%、17.9%、9.2%。
2、在生長育成階段進行干預
十三、始終如一地取得成功的障礙是什么?
1、GDU(后備母豬舍)結構和設施的設計
首次配種時無法達到所需日齡和體重
2、健康挑戰和疾病爆發
(1)藍耳病:康復動物參與配種和分娩,淘汰數量的增加導致配種更多的后備母豬;
(2)仔豬健康挑戰;
(3)腸道疾病:仔豬的母乳攝入量減少,進而導致母豬泌乳量減少;
(4)熱應激:哺乳母豬的目標溫度為21℃。
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影響豬群健康的管理因素
閆之春,新希望六和

圖 閆之春,新希望六和
關于豬群健康管理,比如非瘟處理,有的豬場在很短的時間可以做到清除和凈化。而同樣的方案,有的豬場就失敗了。除了關鍵的方法、原理和技術問題之外,現在是時候重點講一下人和管理的問題,這是非技術類的問題,是管理問題。這也是今天想和大家交流的重點。
一、觀察:為什么不同公司的非瘟疫情處置效果差別巨大?
1、關于在健康管理中人和管理的因素,我們可以使用統計學的方法進行評估。本次報告有1個后期育肥豬的案例,用了統計學的方法做了假設檢驗,來驗證管理的方法是否合理。
2、以豬群健康問題處置的決策流程為例,看一下國內的養豬公司針對豬群健康問題是如何做決策的,存在哪些問題。下圖是理想的流程:
3、實際上,大部分情況卻是這樣的。基層人員不理解獸醫需要收集的信息,比如對癥狀的理解(獸醫要求的是這次疫情的鑒別癥狀)。獸醫不在現場,卻根據收集到的信息做了處置方案。這個方案不一定能在現場執行。總經理(無獸醫背景)也會參與處置方案的落地,可能存在對這個方案的修改或過濾。執行過程中沒有進行評估,執行后的效果也沒有評估。
4、疫情沒有處置好的可能原因有哪些?閆博士從這幾個方面進行了闡述:
5、根據生產實踐和現場的實驗,我們已經解決了多個科學問題:
(1)除了區域撲殺,在已經發現感染的豬群中,通過快速全群檢測,剔除感染豬,完全可以阻斷非洲豬瘟病毒在群內的傳播,可以實現群內凈化;
(2)必須配對檢測!在1個潛伏期內,再次采樣檢測。
6、根據科學結論,開發了多種工程學工具:
(1)精準合樣!豬的樣品可以根據CT值的大小合并后PCR。
(2)沒必要全面消毒,應進行分格洗消。
(3)檢測是可以早期發現的+早期發現是可以剔除的+剔除感染動物是可以阻止病毒群內傳播的+可以實現群內凈化的。
二、假設檢驗:育肥期健康管理的重點應該是什么?
攻克了關鍵科學問題,設計出多種關鍵工具方法,開發了一整套技術方案,但是那么為什么不同養豬企業、同一企業的不同豬場、甚至同一豬場的不同豬群的預防、控制、凈化的效果差別那么大?答案是完全忽視了管理上的問題。管理比技術比原理重要的多。
閆老師舉了育肥后期豬群健康問題來闡述如何使用統計學分析方法來驗證處置方案是否科學。
1、使用統計學方法,提出假設性檢查。
2、使用單因素隨機區組分析,來分析健康問題的原因。同一個飼育肥廠,同樣的飼養員,豬苗的來源相同。把20個批次的肥豬按照日齡、成活率范圍、病原體Ct值和料肉比進行分析。
3、結果
這個案例的主要元兇不是藍耳病,而是偽狂犬感染引發的細菌感染和PCV2引起的病毒血癥。PCV3廣泛感染的致病作用待驗證。
三、總結
1、健康管理所依據的科學基礎、工具方法、配套技術,需要從科學實踐和實驗中開發和驗證得來;
2、在實際經營過程中,這些科學、方法、技術的落地實施,經常且嚴重受到各種管理因素的影響,致使豬群健康問題未能得到及時、有效的解決,時有企業遭受了巨大的損失;
3、豬群健康管理決策的依據,應該根據對對象豬群的科學調研,任何決策依據需要經科學地假設檢驗驗證之后,才能推出;
4、農牧企業在實際條件下的應用研究,已成為行業技術創新的主體。
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從PCV2到PCV3:感覺我們以前也走過這條路
湯姆·佩茨尼克,ArkCare

圖 湯姆·佩茨尼克,ArkCare
第四位演講嘉賓是來自ArkCare的湯姆·佩茨尼克,他針對PCV2和PCV3在美國的發展進行了分享。
他首先對圓環病毒的歷史進行了回顧,PCV2是一種具有重要經濟意義的致病病原體,對于所有生長中的豬接種疫苗起到了很重要的作用。然而,多年來,關于PCV2在疾病過程中的關聯和因果關系一直存在爭論,2006年美國發布第一劑商業PCV2疫苗導致豬肉生產商經濟負增長,主要原因是疫苗的大量投入使豬只存活能力提高,上市豬只數量的突然增加導致。但是在隨后的10多年來,豬仍患有多系統疾病,對此湯姆·佩茨尼克提出了新出現的PCV2和現在的PCV3是否會遵循同樣的路徑這個疑問?
科赫在19世紀提出假設,認為建立因果關系是剛性過程的第一種形式,但是對于PCV2,這些假設是不可能滿足的,一是亞臨床感染未表現明顯癥狀;二是PCV2需要并發感染或免疫刺激。

湯姆·佩茨尼克接著分享到PCV2毫無疑問已經隨著時間的推移而進化了,這種進化與病毒的復制有很大關系。

PVC3的臨床癥狀的分布
湯姆·佩茨尼提出無法通過臨床癥狀去辨別癥狀是哪種病毒引發的,需要進行診斷,目前PCV2存在更高級的診斷技術RNA NGS,Scope。

圖 豬腦病理切片
上圖為豬腦病理切片,紅色為陽性,第四片組織是陽性對照組織。此外脾臟,肝臟也有大量的病毒,其他檢測都相吻合,如下圖所示:

圖病理切片(C為陽性對照)
最后他為此次分享做了全面的總結:
1、新的病原體和病原體毒株繼續出現在世界各地豬肉行業;
2、過去有一種主要病原體,PCV2的歷史,是一個我們不想重復的歷史;
3、需要合理的因果關系標準來幫助這一點的解決;
4、先進的疾病診斷有助于與農場水平上的臨床疾病表達相關聯;
5、跟進學習最新的文獻是推進新興病原體研究的關鍵。
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為了優化性能和最大化凈收入,我們需要了解哪些關于能量的知識
約翰·佩申斯,愛荷華州立大學

圖 約翰·佩申斯,愛荷華州立大學
第五位給我們分享的嘉賓是來自愛荷華州立大學的約翰·佩申斯,其提出豬肉生產成功在一定程度上是取決于誰能以最便宜的價格購買或者生產膳食熱量以及誰能最有效地將這些能量轉化為肉類蛋白質。
首先使用能量價值,我們需要了解它們來自哪里,有多準確,它們的弱點是什么,它們的局限性是什么。然后他通過展示一項研究數據,證明我們對日糧脂肪的消化率存在低估,同時展示了高/低能量玉米消化率和發酵性的差距以及各種原料成分在糞便中、尿液中和熱量增加可能存在的能量損失。他提醒代謝研究測量的是沒有被消化的,而不是被消化的;不能簡單組合能量系統(例如比較屠宰的NE與間接量熱法的NE);維持能量看時間,而不是蛋白質或脂肪增加時的增長速度 ;維持能量是變數而不是恒定的值。

圖高或低能量含量玉米樣品的消化率和發酵性差異
其次,約翰·佩申斯展示了一些試驗成果,如降低能量攝入對120 kg胴體脂蛋白比的影響 :

改變日糧成分對能源狀況的影響,在日糧中添加 10%、20%、30% 中脂 DDGS 后 NE 含量降低:

圖 改變日糧成分對能源狀況的影響
除此之外約翰·佩申總結了生長豬對維持機能和脂質保持所吸收的主要營養物質的理論利用效率。他以生化反應的化學計量學為基礎,計算出不同機體功能對不同營養物質總能量的平均利用效率。

約翰·佩申斯在兩種市場價格下,比較25至135公斤豬在5種不同凈能量和DDGS含量的日糧中的財務回報:65美元/cwt和100美元/cwt。

最后,約翰·佩申斯指出要學會建立和運用能量模型,這可以對最佳飼喂/管理提供依據。
供稿:李建軍 丹俄國際;李偉 丹俄國際
審校:陳芳洲
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