
大腸桿菌表達系統是通過DNA重組技術,在大腸桿菌中高效表達編碼病原微生物保護性抗原基因的一個表達系統。是目前重組蛋白表達的最常用系統,大腸桿菌表達系統研究的較早,具有背景清楚,操作簡便,表達量高等諸多優點。表達水平相對于哺乳動物表達系統來說明顯更高,但也有相對應的缺點,如大腸桿菌系統不能將表達蛋白分泌到胞外,二硫鍵的形成能力有限,不能實現蛋白表達復雜修飾(如糖基化修飾等)。
昆蟲桿狀病毒表達載體系統是利用攜帶有外源目的基因的重組昆蟲桿狀病毒作載體在昆蟲體內或昆蟲培養細胞進行表達生產的一個重組蛋白生產系統。 由于該系統所需要的周期遠比動物或植物系統短,可以利用昆蟲個體或其培養細胞進行大規模的表達生產,生產的重組蛋白產量高,蛋白翻譯后加工比細菌、酵母生產系統完善,而且由于昆蟲桿狀病毒具有限制性的宿主范圍,只對特定種屬的昆蟲及其細胞進行感染,對人畜等脊椎動物沒有感染能力,因此具有比在哺乳動物及其培養細胞生產系統更為安全等優點而成為目前最有效的真核表達系統之一。

為何豬圓環病毒2型疫苗采用大腸桿菌表達系統 豬圓環病毒2型全基因長為1766-1768 bp,為目前已知感染豬群的最小的病毒之一。圓環病毒表面只存在一種結構蛋白(cap蛋白),該蛋白不需要任何糖基化位點修飾,因此采用大腸桿菌表達系統和采用桿狀病毒表達系統從根本而言沒有任何差別。 此外,大腸桿菌表達系統具有操作簡便、周期短,成本低等優點,所以在圓環病毒2型Cap蛋白表達時選擇大腸桿菌表達系統更具有競爭力。 普萊柯豬圓環病毒2型基因工程亞單位疫苗為何采用大腸桿菌源表達系統? 普萊柯生物自2010年上市國內首個全病毒豬圓環病毒2型滅活疫苗(SH株)之后,長期致力于更高品質圓環系列產品的研究與開發,即將上市的豬圓環病毒2型基因工程亞單位疫苗已突破了可溶性蛋白的表達、高純度Cap蛋白提取、病毒樣顆粒組裝3項核心技術,成為國內首個真正意義上的純病毒樣顆粒豬圓環病毒2型疫苗!
透射電鏡下能觀察到CAP蛋白組成的20nm左右的病毒樣顆粒。

通過高分辨率的冷凍電鏡解析VLPs結構可以看到體外組裝的VLPs和病毒衣殼表面結構完全一致!這就保證了VLPs與全病毒具有相同的免疫原性。



綜上所述,表達豬圓環病毒2型Cap蛋白,并組裝成病毒樣顆粒,大腸桿菌表達系統完全可以做得到!
文章來源:普萊柯生物豬苗技術部 徐廷川
技術支持:國家獸用藥品工程技術研究中心
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